حال ہی میں، شانڈونگ یونیورسٹی کے کیلو میڈیکل کالج سے چونہونگ ما، چونیانگ لی اور ژین لیو کے تازہ ترین تحقیقی نتائج سائنس ٹرانسلیشنل میڈیسن کے جریدے میں شائع ہوئے۔
200 سے زیادہ مرکبات کی جانچ کرنے کے بعد، تحقیقی ٹیم نے کامیابی سے ایک چھوٹے مالیکیول کمپاؤنڈ، ML-T7 کی نشاندہی کی، جو TIM-3 کو نشانہ بناتا ہے۔ vivo اور ex vivo کے تجربات کے نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ ML-T7 CD8-مثبت T-cells اور CAR-T-خلیوں کی اینٹی ٹیومر سرگرمی کو بڑھانے کے قابل تھا، اور صرف علاج ہی ٹیومر کے بڑھنے کو براہ راست روکتا ہے۔ چوہوں، اور PD-1 inhibitors کے ساتھ ہم آہنگی کا اثر رکھتے تھے۔
TIM-3 ایک جھلی پروٹین ہے جس کے IgV ساختی ڈومین میں ایک منفرد ڈھانچہ ہے جسے FG-CC' کلیفٹ کہا جاتا ہے، جو اس کے ligand phosphatidylserine (PtdSer) اور carcinoembryonic antigen سے وابستہ سیل آسنجن مالیکیول کے لیے ایک انتہائی محفوظ بائنڈنگ سائٹ ہے۔ 1 (CEACAM1)۔
TIM-3 ایک جھلی پروٹین ہے جس کے IgV ساختی ڈومین میں ایک منفرد ڈھانچہ ہے جسے FG-CC' کلیفٹ کہا جاتا ہے، جو اس کے ligand phosphatidylserine (PtdSer) اور carcinoembryonic antigen سے وابستہ سیل آسنجن مالیکیول کے لیے ایک انتہائی محفوظ بائنڈنگ سائٹ ہے۔ 1 (CEACAM1)۔
اس مطالعہ میں، ٹیم نے ML-T7 کی شناخت 204,380 چھوٹے مالیکیول مرکبات سے Specs ڈیٹا بیس میں ایک ورچوئل اسکریننگ کے ذریعے کی جس کے ساتھ فنکشنل اسکریننگ کی حکمت عملی تھی۔
سطح پلازمون گونج (SRP) اور مالیکیولر ڈائنامکس اور کرسٹل ڈھانچے کے تجزیوں جیسی تکنیکوں کا استعمال کرتے ہوئے، ٹیم نے تصدیق کی کہ ML-T7 خاص طور پر TIM-3 کے FG-CC کے درار کو نشانہ بنا سکتا ہے اور TIM{{{{ سے اس کا تعلق زیادہ ہے۔ PtdSer اور CEACAM1 کے مقابلے میں 4}}۔ ML-T7 FG-CC' کلیفٹ کے ذریعے TIM-3 کے پابند ہونے کو مستحکم کرتا ہے، TIM-3 کی PtdSer، CEACAM1 بائنڈنگ اور تعامل میں خلل ڈالتا ہے۔
ML-T7 کی اسکریننگ اور خصوصیت
ان وٹرو تجربات اور ماؤس ماڈل کے تجربات کے نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ TIM-3 کو ہدف بنا کر، ML-T7 CD8-مثبت سائٹوٹوکسک T خلیات کی بقا، پھیلاؤ، اور اینٹی ٹیومر سرگرمی کو فروغ دینے اور فعال ہونے کو روکنے کے قابل تھا۔ depletion.ML-T7 علاج کے نتیجے میں IL-2/STAT5 سگنلنگ پاتھ وے کی اپ گریجشن، IFN-، TNF-، اور IL-2 جیسے اثر کرنے والے عوامل کی اپ گریجشن، اور ایکٹیویشن مارکر کے اظہار (CD25 اور CD69)، اور سٹیم سیل کی خصوصیت سے متعلق سائٹوکائن (TCF1) اظہار کی سطح میں اضافہ کیا گیا تھا۔ اس کے برعکس، کمی کے نشانات، جیسے PD-1 اور CTLA-4 کے اظہار میں کمی واقع ہوئی تھی، اور ٹرمینل طور پر ختم ہونے والے T خلیات کے تناسب کو کم کر دیا گیا تھا۔
پیدائشی مدافعتی نظام کے قدرتی قاتل خلیات، ڈینڈریٹک خلیات، اور ان کے افعال کو اسی طرح منفی طور پر TIM-3 کے ذریعے منظم کیا گیا تھا۔ خاص طور پر ڈینڈریٹک خلیوں میں، TIM-4 کا ایک مخصوص اعلی اظہار بھی ہوتا ہے۔ تحقیقی ٹیم نے پایا کہ ML-T7 نہ صرف قدرتی قاتل خلیوں کی ہلاکت کی سرگرمی کو بڑھاتا ہے، بلکہ ڈینڈریٹک خلیوں کی پختگی کو بھی فروغ دیتا ہے اور TIM-3 اور TIM-4 پر عمل کرکے ان کی اینٹیجن پیش کرنے کی صلاحیت کو بڑھاتا ہے۔ .
مختلف قسم کے بنیادی ہیپاٹو سیلولر کارسنوما ماؤس ماڈلز کا استعمال کرتے ہوئے، انہوں نے ML-T7 کے علاج کے اثرات کا مشاہدہ کیا۔ نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ ML-T7 کے ساتھ 20 mg/kg یا 50 mg/kg کی خوراک میں ہر دو دن میں انٹراپریٹونی طور پر انجیکشن لگانے سے ٹیومر کی نشوونما کو نمایاں طور پر روکا جاتا ہے اور چوہوں کی بقا کا وقت طویل ہوتا ہے اور ٹیومر مائکرو ماحولیات کے مقابلے میں ٹیومر کی مدافعتی نوعیت کو کم کیا جاتا ہے۔ کنٹرول گروپ۔
مزید مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ اکیلے 20 mg/kg ML-T7 کے علاج میں 100 mg/kg PD-1 inhibitor کے علاج سے ملتے جلتے اینٹی ٹیومر سرگرمی تھی، اور جب ان دونوں کو ملا کر استعمال کیا جاتا تھا تو ان کا ایک ہم آہنگی اثر ہوتا تھا۔ ٹیومر مائکرو ماحولیات میں CD8-مثبت T خلیات اور قدرتی قاتل خلیات کو دوبارہ فعال کرنا۔ مرکب کے ساتھ علاج کے 120 دن بعد، 50% چوہے بچ گئے (3/6 چوہے)، جبکہ ML-T7 یا PD-1 inhibitor کے ساتھ علاج کیے گئے چوہے بمشکل ہی بچ پائے (0/6 چوہے یا 1/6 چوہے۔ بچ گیا)۔
PD-1 inhibitors کے ساتھ امتزاج تھراپی کا اثر
اس کے علاوہ، ML-T7 کا علاج ٹیومر خلیوں کے خلاف CAR-T خلیوں کی cytotoxicity کو نمایاں طور پر بڑھا سکتا ہے، جبکہ CAR-T خلیوں کو apoptosis کو کم کرنے اور اوورٹ میٹاسٹیسیس کے بعد پھیلاؤ میں اضافہ کرنے کے لیے آمادہ کرتا ہے۔ مزید یہ کہ ML-T7 کے علاج نے CAR-T سیل تھراپی میں مشکل مسئلے پر مؤثر طریقے سے قابو پایا، یعنی فنکشنل کمی کو روکنا، اس طرح CAR-T سیل کی افادیت کو بہتر بنایا، جس میں 10 μM ML-T7 CAR-T سیل کو ریورس کرنے میں سب سے زیادہ موثر تھا۔ کمی
CAR-T خلیوں کو بڑھانے کے لیے
حفاظت کے لحاظ سے، ML-T7 کو اچھی طرح سے برداشت کیا گیا تھا، اور ML-T7 کی 50 mg/kg خوراک کے ساتھ علاج ہر دو دن میں intraperitoneally انجیکشن لگانے سے چوہوں میں اہم منفی واقعات نہیں ہوئے۔
مجموعی طور پر، اس مطالعے نے ٹیومر امیونو تھراپی میں استعمال کے لیے ML-T7، TIM-3 کا ایک چھوٹا مالیکیول روکنے والا، کی زبردست صلاحیت کا مظاہرہ کیا۔ CAR-T سیل تھراپی اور PD-1 inhibitor تھراپی کی ٹیومر کی سرگرمی، جو محفوظ اور موثر ہے، اور طبی ترجمہ کے لیے مزید تیار کیے جانے کا مستحق ہے۔
